肺炎支原体DNA检测对儿童肺炎的诊断价值
师志云
支原体肺炎又称原发性非典型肺炎，由肺炎支原体感染引起的，主要有顽固持久性咳嗽、呼吸困难、头痛发热以及咽喉疼痛等临床症状，是儿童和青少年最常见的肺炎之一。近些年来，肺炎支原体（MP）在儿童中的感染率呈上升的趋势，由于其临床表现的复杂性和不典型性，早期诊断较为困难，确诊需要依靠实验室检测，而荧光定量PCR技术是诊断肺炎支原体感染的有效方法，具有快速诊断价值。本研究应用荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术对2012年1月至2015年12月来本院就诊的患儿进行MP DNA检测，按照不同性别、年龄及不同季节对检测阳性者进行比较分析，报道如下。
1、资料与方法
1.1标本来源：2012年1月至2015年12月来本院就诊的957例门诊和住院患儿，男592例，女365例，年龄范围0-14岁。根据儿童的正常生长发育特点，将各年龄段分布如下：0-1岁组；2-3岁组；4-6岁组；7-14岁组。根据宁夏地区的季节特点，将各季节划分如下：春季（3-5月）；夏季（6-8月）；秋季（9-11月）；冬季（12-2月）。
1.2仪器与试剂：美国ABI公司7300型荧光定量PCR仪，MP-DNA检测试剂盒是由中山大学达安基因股份有限公司提供。
1.3方法:严格按仪器和试剂相关说明书进行操作。
1.4统计学方法：所有数据采用SPSS17.0统计软件分析，通过对计数资料各组间的阳性率比较，进行χ2检验分析，P﹤0.05为差异有统计学意义。
２．结果
2.1MP-DNA检测总阳性率情况:
我院门诊和住院患儿MP-DNA检测共957例，总阳性人数106例，总阳性率11.08%。
2.2不同性别MP-DNA阳性率比较：
592例男性患儿，总阳性例数54例，总阳性率9.12%；365例女性患儿，总阳性例数52例，总阳性率14.25%。女性患儿的MP-DNA检测总阳性率明显高于男性患儿，且两组间的阳性率差别有统计学意义（χ2=5.512，P<0 .05）。见表1。
表1 不同性别儿童的MP阳性率比较
组别
| 总例数
| 阳性例数
| 阳性率(%)
| χ2
| P*
|
男
| 592
| 54
| 9.12
| 5.512
| 0.019
|
女
| 365
| 52
| 14.25
|
注：*P<0 .05，差别有统计学意义
2.3不同年龄MP-DNA阳性率比较：
各年龄组的阳性率有所不同，其中4-6岁组的阳性率最高，为18.63%；其次是7-14岁组，阳性率为13.54%；2-3岁组的阳性率最低，为4.51%，各年龄组之间差别有统计学意义（χ2=14.969 ，P<0 .05）。见表2。
表2 不同年龄组儿童的MP阳性率比较
组别
| 总例数
| 阳性例数
| 阳性率（%）
| χ2
| P*
|
0-1岁
| 397
| 37
| 9.32
| 14.969
| 0.002
|
2-3岁
| 133
| 6
| 4.51
|
4-6岁
| 102
| 19
| 18.63
|
7-14岁
| 325
| 44
| 13.54
|
注：*P<0 .05，差别有统计学意义
2.4不同季节MP-DNA阳性率比较：
各季节均可检测到MP-DNA阳性结果，其中夏季阳性率最高，为16%；其次是春季阳性率，为12.15%，秋季阳性率最低，为7.18%，各组间差别有统计学意义（χ2=8.599，P<0 .05）。见表3。
表3 不同季节儿童的MP阳性率比较
季节
| 总例数
| 阳性例数
| 阳性率（%）
| χ2
| P*
|
春
| 181
| 22
| 12.15
| 8.599
| 0.035
|
夏
| 200
| 32
| 16
|
秋
| 226
| 16
| 7.08
|
冬
| 339
| 37
| 10.91
|
注：*P<0 .05，差别有统计学意义
３.讨论
肺炎支原体是儿童和青少年呼吸道感染的主要原因，也是引起社区获得性肺炎的常见病原体，仅次于肺炎链球菌肺炎。肺炎支原体的感染呈现全球性分布，每3-7年可发生周期性的流行。Rebecca J.Brown等研究认为，在英国肺炎支原体感染平均以每4年为周期暴发流行。本研究表明，在宁夏地区共957例感染MP的患儿中，阳性例数106例，阳性率11.08%，明显低于李春仙报道的在宁波地区，肺炎支原体感染患儿的阳性率为31.27%，也低于阳爱梅报道的湖南长沙地区的阳性率29.07%，但是本研究与吴俊英[6]报道的浙江地区的阳性率16.35%相近。分析其原因，可能与不同地区的地理环境、检测方法的不同以及不同医院抗生素的使用情况等因素有关。本研究中男性患儿阳性率9.12%,女性患儿的阳性率为14.25%，女性患儿的阳性率明显高于男性，且差别有统计学意义。与李春仙报道的相似，可能女性患儿更容易感染MP,还需要进一步的研究证明。
不同年龄组的MP感染阳性率差别较大，本研究表明，4-6岁组的阳性率最高，为18.63%，与李春仙报道内容相似，可能与学龄儿童在学校的集体生活，加上免疫系统发育尚不完善，通过飞沫传播，造成大范围的流行有关。其次是7-14岁组，阳性率略有下降，为13.54%，可能与该年龄组儿童身体的抵抗力有所增强有关。2-3岁组的阳性率最低，为4.51%，可能与活动范围相对较小有关。
肺炎支原体感染随季节的不同也有所不同。吴俊英曾报道浙江地区以冬春季多见，周喜友报道的广东地区以冬季感染率高，而阳爱梅则报道湖南长沙以夏秋季多发。近期，Chao Yan等人报道了北京2015年从1月到12月MP的阳性感染率，显示从5月就持续增高直到12月，预测这次暴发将可能持续到2016年。本研究显示宁夏地区以春夏季多发，可能与季节的温度和湿度适宜肺炎支原体的生长及繁殖有关，还需进一步的研究。
综上所述，由于4-6年龄组多发，故应加强对该年龄段儿童预防措施，尽量早期发现，及时治疗，合理用药，避免滥用抗生素对儿童身体的损害。而FQ-PCR对MP-DNA的定量检测有利于肺炎支原体肺炎的早期诊断、减少了肺外并发症的发生以及误诊率，提高了检验的准确率，对临床的诊断有重要的意义。
